3. függelék

3. Színes reakciók fehérjék

Szín reakciókat meghatározásához használt fehérje jellegű anyagok, fehérje azonosítása és mennyiségi meghatározása az aminosav-összetétel különböző biológiai folyadékokban. A klinikai laboratóriumi gyakorlatban, ezek a módszerek arra használják, hogy meghatározzák a fehérje mennyiségét a vérplazmában aminosavak a vizeletben és a vérben, a kimutatására veleszületett és szerzett anyagcsere újszülött kórképek.

Biuret reakció a peptidkötés.

Ez alapján a képessége peptidkötések (-CO-NH-), hogy egy réz-szulfát, bázisos közegben színes komplex vegyületek, a szín intenzitása, amely attól függ, hogy a hossza a polipeptid-lánc. A fehérje-oldatot ad kékeslila színű.

1) tojásfehérje, 1% -os oldat (tyúktojás fehérje gézen átszűrtük, és desztillált vízzel hígítjuk, 1,10);

2) NaOH, 10% -os oldatban;

3) Cu (OH) 2, 1% -os oldat.

Ennek során a meghatározást. Abban, hogy a cső 5 csepp tojás fehérje oldat, 3 csepp NaOH, 1 Cu (OH) 2 keverjük csepp. A tartalom a kémcső válik kék-ibolya színű.

ÖSSZEFOGLALÁS reakció kialakulását a vegyület színű kék ​​és a lila, és ninhidrinnel álló aminosav-hidrolízis termékek. Ez a reakció jellemző az amino-helyzet a jelen a természetes aminosavak és fehérjék.

1) tojásfehérje, 1% -os oldatban;

2) ninhidrin 0,5% -os vizes oldatban

Ennek során a meghatározást. Abban, hogy a cső 5 csepp tojás fehérje oldathoz, és ezután 5 csepp ninhidrin, az elegyet visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Úgy tűnik, rózsaszínes-lilás színű, múló idő a kék-lila.

Amikor adunk a fehérje oldathoz, tömény salétromsav és melegítjük a sárga szín jelenik meg, átadva jelenlétében alkáli-narancssárga. ÖSSZEFOGLALÁS reakció abban áll, nitrálását a benzolgyűrű gyűrűs aminosav salétromsavval, hogy létrehozzák a nitrovegyületek kicsapódni. A reakció jelenlétét mutatja ciklikus aminosavak a fehérje.

1) tojásfehérje, 1% -os oldatban;

2) tömény salétromsav;

3) NaOH, 10% -os oldat.

Ennek során a meghatározást. Ahhoz, hogy 5 cseppenként tojásfehérje oldathoz 3 csepp salétromsavat (óvatosan!) Melegítjük. Úgy tűnik, sárga csapadék képződik. Lehűtés után (előnyösen a csapadék) 10 csepp nátrium-hidroxid, egy narancs színű.

Triptofán aminosav-savas közegben, kölcsönhatásba savval aldehidek, kondenzációs termékeket képez vörös-ibolya színű.

1) hígítatlan tojásfehérje

2) egy koncentrált (jégecet) -ecetsav;

3) a tömény kénsav.

Ennek során a meghatározást. Ahhoz, hogy egy fehérjét cseppenként hozzáadunk 10 csepp ecetsavat. Billentése a cső fala óvatosan hozzáadunk cseppenként 0,5 ml kénsavat úgy, hogy a folyadék nem keveredett. Álláskor a csövekben folyékony szélén jelenik meg vöröses-lila gyűrű.

Aminosavak tartalmazó szulfhidril - SH, majd lúgos hidrolízis után nátrium-szulfiddal Na 2 S. Az utóbbi, kölcsönhatásban a nátrium-plumbit (a reakció során képződött közötti ólom-acetát és nátrium-hidroxid), egy csapadékot képez, ólom-szulfid PbS fekete vagy barna.

1) tojásfehérje, 1% -os oldatban;

2) Foll-reagenst (5% ólom-acetát-oldatot adunk azonos térfogatú 30% -os NaOH oldattal, hogy feloldja a kivált csapadékot).

Ennek során a meghatározást. Az 5 fehérje oldathoz cseppenként hozzáadunk 5 csepp Foll-reagenst, és az elegyet 2-3 percig. Állás után 1-2 perc. Úgy tűnik, fekete vagy barna csapadék.

---